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Technical Insight

SPR 检测蛋白与小分子亲和力的基本原理

表面等离子共振(SPR)通过监测传感器表面折射率变化,实时记录分析物与固定化配体的结合和解离,无需荧光标记即可获得亲和力及动力学信息。

更新日期:

术语与原理

SPR 响应信号与传感器表面质量变化相关,浓度梯度数据可用于拟合结合速率、解离速率和亲和力常数。

适用场景

  • 蛋白小分子结合验证
  • 抗体抗原动力学分析
  • 候选分子排序

方法与流程

  1. 1.选择配体与芯片固定策略
  2. 2.设置分析物浓度梯度
  3. 3.采集结合解离曲线
  4. 4.进行模型拟合与质量检查

常见误区

  • 忽略非特异性结合
  • 浓度梯度覆盖不足
  • 直接接受不合理的拟合模型

常见问题

SPR 是否需要标记样品?

SPR 通常采用无标记检测,但其中一方需要以适当方式固定到传感器表面。

SPR 可以输出哪些参数?

根据实验设计可输出响应曲线、ka、kd、KD 和拟合质量信息。

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