Technical Insight
MST 检测的适用场景与样品要求
微量热泳动(MST)根据分子在微观温度梯度中的运动变化检测结合,适用于多种分子互作体系,并可在较低样品消耗下完成亲和力分析。
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术语与原理
分子结合会改变尺寸、电荷和水化层,从而改变热泳动行为;通过浓度梯度曲线可拟合结合亲和力。
适用场景
- 蛋白小分子亲和力
- 蛋白蛋白互作
- 核酸结合
- 溶液态交叉验证
方法与流程
- 1.选择荧光策略
- 2.检查样品均一性
- 3.设置浓度梯度
- 4.进行毛细管扫描
- 5.拟合并检查曲线
常见误区
- 样品吸附毛细管
- 自发荧光干扰
- 聚集或沉淀
- 浓度范围不覆盖结合区间
常见问题
MST 是否需要固定样品?
MST 在溶液中检测,通常不需要将分子固定到传感器表面。
哪些因素会影响 MST 数据?
样品聚集、吸附、自发荧光、缓冲液差异和不合适的浓度范围都会影响结果。
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