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Technical Insight

MST 检测的适用场景与样品要求

微量热泳动(MST)根据分子在微观温度梯度中的运动变化检测结合,适用于多种分子互作体系,并可在较低样品消耗下完成亲和力分析。

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术语与原理

分子结合会改变尺寸、电荷和水化层,从而改变热泳动行为;通过浓度梯度曲线可拟合结合亲和力。

适用场景

  • 蛋白小分子亲和力
  • 蛋白蛋白互作
  • 核酸结合
  • 溶液态交叉验证

方法与流程

  1. 1.选择荧光策略
  2. 2.检查样品均一性
  3. 3.设置浓度梯度
  4. 4.进行毛细管扫描
  5. 5.拟合并检查曲线

常见误区

  • 样品吸附毛细管
  • 自发荧光干扰
  • 聚集或沉淀
  • 浓度范围不覆盖结合区间

常见问题

MST 是否需要固定样品?

MST 在溶液中检测,通常不需要将分子固定到传感器表面。

哪些因素会影响 MST 数据?

样品聚集、吸附、自发荧光、缓冲液差异和不合适的浓度范围都会影响结果。

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