Technical Insight
SPR、MST、ITC 如何选择？
SPR、MST 和 ITC 都可用于研究分子间结合，但三者对样品、固定方式和数据输出的侧重点不同。需要动力学参数时通常优先考虑 SPR，需要溶液态亲和力验证时可考虑 MST，需要完整热力学信息时可考虑 ITC。
更新日期：
术语与原理
SPR 实时监测传感器表面的结合与解离，MST 根据温度梯度中的分子运动变化测量结合，ITC 通过滴定过程中的热量变化获得亲和力和热力学参数。
适用场景
- 蛋白与小分子亲和力测定
- 抗体抗原结合验证
- 多方法交叉验证
方法与流程
- 1.明确需要亲和力、动力学还是热力学参数
- 2.评估样品量、纯度和缓冲液
- 3.选择主方法并设计必要的交叉验证
常见误区
- 只按仪器名称选择方法
- 忽略固定化对分子活性的影响
- 未评估缓冲液和样品浓度
常见问题
哪种方法可以获得结合和解离速率？
SPR 可实时记录结合与解离过程，适合获得 ka、kd 和 KD 等动力学参数。
是否必须只选择一种方法？
不一定。关键项目可使用不同原理的方法进行交叉验证。